引子：近日，由广州市第十二人民医院、香港大学和英国伯明翰大学合作开展的“生命银行”正式落户广州，并开展一项研究“基因、生活方式及环境因素对致命性疾病的影响”的项目。该项目准备用4-5年的时间，在广州地区收集5万名50岁以上广州居民建立队列，进行问卷调查、医学检查以获得他们生活方式、环境职业因素和健康状况等方面的信息，并抽取每人的血液样本，储存在液态氮中用于将来基因方面的分析。据悉，如此大型的队列生物库研究，在我国尚属首家。

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　　近日，记者走进广州市第十二人民医院，探访了分子流行病学研究室，为读者揭开“生命银行”神秘的面纱。并通过采访该项目的主要负责人江朝强，了解到“生命银行”背后一段鲜为人知的故事。

　　广州市第十二人民医院的院长江朝强最近特别忙，作为项目组的三位主要负责人之一，他这几天每天都要忙着开各种会议，与香港和英国专家交换意见。但他显然心情不错，原定给记者1个小时访问时间，最后延长了半个多小时。这种好心情源自于一个好的结尾，一个好的开头：前后论证了四年之久的“生命银行”终于在广州落户，并逐渐形成了规模；如果计划顺利，到今年9月份，首期1万名研究对象资料收集完成的时候，种下的“树”，就该结第一批“果子”了。

　　最初动因

　　比如石棉工人，患肺癌的几率高，这可以从化学环境职业接触上解释。但也有接触者一辈子不致癌，这些人体内是否存在某种特殊基因呢？

　　其实“生命银行”只是一个通俗的说法，按照江朝强的解释，称之为“生物库(biobank)”更加科学。

　　3月5日下午，广州市十二医院的会议室。说起“生命银行”的诞生，江朝强非常感慨。“说来话长，生命银行能落户在广州，落户在十二医院，最早要追溯到1986年，我和林大庆教授认识开始。”

　　1986年，江朝强去香港参加国际棉尘病研讨会。在那次会议上，他认识了时任香港大学医学院副院长的林大庆教授。在谈到职业病防治时，林大庆教授就问起能不能穗港联手，就纺织厂的职业危害情况进行探讨合作。当时担任广州市十二医院副院长的江朝强回到医院后，立即向院里和市卫生局做了汇报。获得上级的支持后，江朝强等人很快就设计了一个合作方案寄给了林大庆。这次合作，给林大庆留下了很好的印象：“你们的效率很快啊。”江朝强对他们的“第一次握手”记忆犹新。

　　“为什么要搞生物库？建立生命银行？其实已经很好解答。”江朝强举例说：现在医学认为恶性肿瘤与环境化学因素有关。比如石棉工人，患肺癌的几率很高，这可以从化学环境职业接触上解释。但也有接触者一辈子不致癌，是否这些人体内存在某种特殊基因呢？

　　“国际上目前最先进的是从分子水平上进行研究，即从基因DNA水平上去研究。”

　　江朝强回忆说，最早提出建立“生命银行”，把基因研究引入进来的，正是林大庆教授。“1998年，林教授就提出了这一想法。”

　　如何合作

　　他们最初想，把采集到血液样本送到英国牛津大学的液态氮库中保存。但国家规定生物制品不能出口，尤其基因的生物制品更是禁止运到国外。怎么办？

　　然而，建立“生命银行”并不是一件容易事。“这一项目不仅需要资金支持，更关键的是后续管理问题。”

　　1999年5月，江朝强与香港大学的林大庆教授来到英国牛津大学临床试验研究所，拜会了该所研究小组成员、诺贝尔奖提名人Prof.Doll和资深教授R.Peto所长。英方专家答应给予支持。

　　当时，世界上只有英国、美国和冰岛等少数发达国家建立了条件很好的液态氮库。“我们最先的想法，是只做队列研究，把采集到血液样本送到牛津大学的液态氮库中保存。当时牛津大学也愿意免费提供存放场所。”但是，江朝强很快了解到，国家已经规定生物制品不能出口，尤其基因的生物制品更是禁止运到国外。——这条路走不通。

　　“当时林大庆教授也想在香港建液态氮库，但最后也以流产告终。”但是，“生命银行”的计划并未就此“流产”。

　　2001年，他们再次来到英国，探讨在中国建立储存库技术上是否可行。伯明翰大学的公共卫生学系主任KK.cheng教授对此非常感兴趣，并要求加入这一世界上先进的研究项目。穗港英合作出现雏形。

　　2001年9月，应邀请，江朝强随同市卫生局领导，以及林大庆教授等人，再次访问英国牛津大学。在这次会谈中，R.Peto教授再次承诺技术支持，同时英国伯明翰大学的KK.Cheng教授承诺筹备资金投入(第一期12万英镑约160万港元)，林大庆教授第一期筹备投入200万港元。

　　2002年6月，穗港英三方初步确定2003年春天在广州市十二医院挂上“穗港英分子流行病学合作研究中心”的牌子，并正式开展课题研究。经过长达4年的酝酿和论证，2002年11月，广州市科技局正式批准该项目为广州市科技攻关重点项目。

　　怎样建设

　　建立生命银行，最关键的问题在于管理。所以，他们配备了三套电路确保生命银行中样本的安全

　　“建立生命银行，最关键的问题在于管理。”江朝强强调说。

　　2003年8月份，市十二医院对地下室进行了装修并设置了通风系统，从美国购买了两个MVE1830HE液态储存罐。

　　“我们这个项目启动的资金有800万元，目前已经花掉约400万，光整个液态氮超低温储存系统就投入了约110万元。”江朝强告诉记者，为了保证储存在“生命银行”中的样本安全，保持细胞活性，医院给“生命银行”安装了三套电路。“医院本身原有两套电路，为防万一，我们又加了一套自动发电系统。”

　　“我们做的是长远的事情。打个比方说，我们好比是种树的，‘结果’是5年10年以后的事情。”

　　去年9月1日，项目正式启动，至今已经完成4200多名研究对象以及关于他们的生活方式、环境因素和健康状况等信息的收集和检查，并抽取了每个研究对象的血液样本。

　　该项目成员之一、市十二医院职业健康监护科副主任张维森告诉记者，“等到大树‘结果’的时候，我们就可以分析为什么有些果子长得好，有些果子长得不好。通过随访追踪的方式，找到队列患病、发病和死亡的危险因素。”

　　江朝强说，经过5-10年的追踪后，将获得足够的病例，便可采取巢式病例对照研究恶性肿瘤、脑中风、冠心病、糖尿病等疾病的基因状况，例如是否有基因变异、新基因形成等、微量元素及生化改变等因素，分析其原因和机理，为疾病的控制、预防和临床治疗提供科学依据。

　　三大疑问

　　合作会否导致基因泄密

　　穗港英三地合作，无论从项目资金还是从技术支持角度考虑，都是非常好的协作模式。但是，这种合作模式是否会导致“基因泄密”？2002年媒体曾经关注过轰动一时的“安徽基因事件”：美国哈佛大学在中国安徽地区进行基因研究项目，采集当地农民的血样并送到美国进行研究。有专家就此提出了基因安全的问题。

　　对此，项目主要负责人江朝强十分肯定地告诉记者，不存在这样的危险。因为虽然是合作项目，但存在“生命银行”中的血液样本，所有权在“穗”。“英国和香港方面对这些资源有共享的科学研究权利，可以用于科学研究，但是，他们不能把这些血液样本带走。”他告诉记者，国家1998年就有规定，生物制品不能出口，尤其是基因方面的生物制品。“这也是我们自己出巨资建立液态氮库的重要原因。”

　　“除此之外，穗港英三地合作研究的项目申报科研成果时，在内地就使用‘穗港英’，在香港就使用‘港穗英’，在英国申报则用‘英穗港’的名称。但如果是在国际上申报科研成果，使用的名称依旧是‘穗港英’。”江朝强说，这都是事先签好协议的。

　　研究对象为何全是老人

　　广州队列生物库研究要选择5万名50岁以上的老人作为研究对象，并做5 -10年的追踪调查。“生命银行”为何选择老人作为研究对象呢？

　　对于这一问题，江朝强解释说，原因有三方面：一方面，广州以及全国人口正走向老龄化，而一些致命性疾病如脑中风、恶性肿瘤等，在老人中发生的比率远高于年轻人；另一方面，由于老人的生活比较稳定，作为研究人群，容易进行后续的追踪调查，而且项目选择的首期1万名老人都是尊老康乐协会的会员，对追踪也有利；同时，老人的发病时间比较短，在5-10年的监测期中容易出现可以对照的结果。相比较来说，年轻人群要出现明显的发病对比不太容易。

　　如何保护受访者隐私权

　　记者看到，在长达55页的调查问卷中，除了问及被调查者详尽的生活习惯、职业环境等方面外，也需要受访者留下详细的个人资料。那么这些非常隐私的资料如何保护呢？

　　江告诉记者，这些受访者的个人资料都是保密的，在输入计算机后，设有专门的密码，只有个别课题组的研究人员才拥有这个密码。另外，每个受访者的资料在输入电脑时，都有一个代号，血液样本在存进液态氮库时，也用一种从丹麦进口的条形码进行标识。“这样可以充分防止将样本混淆。”江朝强说。

　　“生命银行”血液样本制作需要十几道工序

　　“生命银行”中到底有些什么？医学资料是如何收集和保存的？近日，记者走进广州市第十二人民医院穗港英分子流行病学研究室，跟踪了从问卷调查到抽血，从血样处理到进入液态氮罐储存的整个过程。其中，“加工”一份血液样本就需要十几道工序。

　　【准备】

　　问卷细到“吃辣”程度

　　3月5日上午，记者在分子流行病学研究室外的房间里，看到来自尊老康乐协会的老人们正在接受问卷调查。每位受访者都将先接受一份长达55页的问卷调查。这些调查除个人背景信息、个人病史和家族病史外，还细致到吸烟史、喝酒、喝茶、饮食习惯，体力活动状况，被动吸烟与室内空气污染，精神记忆力和睡眠情况，女性生育史、物理体检等，共有十三个部分。整个问卷大约要花一个小时。

　　研究人员告诉记者，如此细致全面科学的问卷调查，在国内很少见。而且，这份调查问卷的设计引入了社会心理范畴的问题，比如“在您的家庭成员和朋友中，是否有人在您遇到困难时能够交流谈心”等……专家认为，人生中心理上遭遇的打击与健康也可能存在某种关联，因此，设计这些问题也是为了进行前瞻性研究。

　　记者看到，在问到受访者饮食习惯时，甚至细致到喜欢吃辣的程度，并分出“微辣、较辣、很辣”。

　　问卷结束后，医护人员还将为老人进行血压、心电图、X线胸片、肺功能等检查，并抽取18ml的血样(其中8ml在体检时即进行血常规、血生化检查，余下10ml经处理后储存在液态氮中，用于将来做基因等方面的分析)。

　　调查结束后，医院将主要体检结果，包括实验室血常规、乙肝两对半和生化26项等提供给本人，由个人保存。市十二医院江院长告诉记者，对首期一万名受访者，医院各项检查不仅全部免费，而且检查出有病需要治疗时，病人也可以自己选择医院进行治疗。

　　项目组成员朱彤医生“入行”已经15年，原本是广州市呼吸疾病研究所一员的她，因为觉得生物库这个项目“非常具有前景”，欣然加入，并成为实验室筹备的“元老”之一。

　　【制作】

　　每月处理千份样本

　　朱彤告诉记者，处理血液样本的实验室目前共有5名工作人员。这5个人每天要把采集到的45份血液样本，经过十几道工序的加工，处理成“合格”的产品，存放进液态氮罐中。“我们的计划是一个月处理1000份样本。这项工作一点马虎不得，因为储存起来的样本，是要在5年、10年后拿出来做研究用的。”

　　“去年8月，实验室正式开始运作，前三个月里每天加班到七八点钟是很正常的事。”朱彤介绍说，因为国内几乎没有建立液态氮生物库的经验，所有的技术标准和操作程序，都是一步步摸索出来的。

　　最后每位被调查者的血液样本都会被处理成两份分别为1.5ml的血浆和白细胞，而基因信息就在白细胞中。这些保存下来的样本，在超低温的条件下可以长时间保持细胞活性，成为5—10年后科学研究的珍贵资料。“生命银行”的通俗称法，也大致源出于此。

　　“分离白细胞需要非常复杂的科研方法，我们现在却要实现大批量的运作，困难正在于此。”

　　血液样本制作流程

　　在朱彤医生的带领下，记者进入实验室中，首先映入眼帘的就是两个大柜子。“所有的操作都是在P2级的生物安全柜下无菌的进行，这是最首要的一点。”朱彤介绍说。

　　分离细胞和血浆

　　装在真空采血管中的血液样本经过初步离心后，分离出血浆和细胞(包括白细胞和红细胞等)两部分。在抽出血浆后，剩下的细胞还要进行更复杂的工序，以分离出“含有基因信息的白细胞”。

　　分离白细胞

　　在记者看来，分离白细胞的过程显然相当复杂。研究人员首先要用真空采血管把稀释后的细胞，缓缓注入到一支装有透明试剂的试管内。朱彤告诉记者，这种叫做FICOLL的试剂是从国外进口的，一瓶要700多元人民币，用来分离白细胞，实验室每天起码要消耗一瓶。

　　接下来，这支试管要放到eppendorf台式低温高速离心机中进行30分钟的再次离心。30分钟后，取出的试管已经分离出了三个不同的层次。“你看，这支分离得真‘漂亮’！”朱彤指着其中一支试管开心地说，“我们需要的是中间薄薄的一层白细胞。所以操作的时候，又得非常小心才行。”在两层液体中，抽取中间一层不到0.5厘米高度的白细胞，在记者看来简直像“绣花”。

　　还没完呢。取出的白细胞，因为还混有离心试剂、稀释液等杂质，必须用一种平衡盐洗涤三次，保证把所有残留的东西去掉。然后，还要给细胞加入一份细胞冻存保护液，避免细胞一下子进入超低温环境破裂。

　　试管降温

　　“完成后的试管，还得进行严密的程控降温，基本上每分钟1摄氏度的速度，梯度降温到零下80摄氏度。一周之内再转存到液态氮库零下196摄氏度的环境中。”朱彤告诉记者，每次开液态氮罐，都会造成氮的损失，所以每周才开一次。

　　入库保存

　　每位受访者的血液样本都有一张特定的条形码，就像身份证号码一样，以避免混淆。“这种条形码也是国外进口的，能够保证在超低温环境下使用。”朱彤介绍说。每个液态氮罐可存放约7万支试管，每个研究对象的样本分装4支试管，分成两份储存到不同的液态氮罐中，以备将来分析。

　　“血液样本总共要经过十几道的技术工序，这还不包括管理工序，才能入库保存。”朱彤说。

　　记者 严慧芳 石磊 通讯员杨萍